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ELISA試劑盒選擇方法和注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2018-05-30   點(diǎn)擊次數(shù):1412次

ELISA試劑盒留意事項(xiàng):
1.請每次測定的一起做規(guī)范曲線,應(yīng)該做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測定,核算時(shí)請zui終乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
2.封板膜只限一次性運(yùn)用,以避免交叉污染。
3.底物請避光保存。
4.嚴(yán)厲按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)成果判定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
ELISA試劑盒選擇辦法:
(1)酶符號抗體作業(yè)濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶符號抗體部份)。然后再固定其它條件或采納“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶符號抗體分別為不同的稀釋度)在正式試驗(yàn)體系里地滴定其作業(yè)濃度。
(2)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反響,而自身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌效果,應(yīng)留意防護(hù)。有條件者應(yīng)運(yùn)用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是現(xiàn)在較為滿足的供氫體。底物效果一段時(shí)刻后,應(yīng)參加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以停止反響。一般底物效果時(shí)刻,以10-30分鐘為宜。底物運(yùn)用液有必要新鮮制造,尤其是H2O2在臨用前參加。

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